กรดโปรตีเอส

การประยุกต์ใช้และหลักการ

โปรตีเอสของกรดนี้ใช้เพื่อตรวจสอบกิจกรรมของโปรตีเอสซึ่งแสดงเป็นหน่วยฮีโมโกลบินบนพื้นฐานไทโรซีน (HUT) ของการเตรียมที่ได้จาก Aspergillus oryzae var และ Aspergillus niger var และอาจใช้เพื่อกำหนดกิจกรรมของโปรตีเอสอื่นที่ pH 4.7 . การทดสอบขึ้นอยู่กับการย่อยสลายด้วยเอนไซม์ 30 นาทีของสารตั้งต้นฮีโมโกลบินที่ pH 4.7 และ 40 ° สารตั้งต้นที่ไม่ได้ไฮโดรไลซ์จะตกตะกอนด้วยกรดไตรคลอโรอะซิติกและถูกกำจัดออกโดยการกรอง ปริมาณของฮีโมโกลบินที่ละลายได้ในฟิลเตรตถูกกำหนดโดยสเปกโตรโฟโตเมตริก

รีเอเจนต์และการแก้ปัญหาของกรดโปรตีเอส
เฮโมโกลบินใช้เฮโมโกลบิน Substrate Powder (Sigma Chemical Co. , Catalog No. H2625) หรือวัสดุคุณภาพสูงที่คล้ายกันซึ่งละลายในน้ำได้อย่างสมบูรณ์
สารละลายอะซิเตทบัฟเฟอร์ละลายโซเดียมอะซิเตท 136 กรัม (NaC2H3O2 · 3H2O) ในน้ำให้เพียงพอเพื่อให้ได้ 500 มล. ผสมสารละลายนี้ 25.0 มล. กับกรดอะซิติก 1 ม. 50.0 มล. เจือจางถึง 1,000 มล. กับน้ำแล้วผสม pH ของสารละลายนี้ควรเป็น 4.7 ± 0.02
พื้นผิวสารละลายถ่ายโอนฮีโมโกลบิน 4.0 กรัมลงในบีกเกอร์ 250 มล. เติมน้ำ 100 มล. แล้วคนให้ละลายเป็นเวลา 10 นาที จุ่มอิเล็กโทรดของเครื่องวัดค่า pH ในสารละลายและในขณะที่กวนอย่างต่อเนื่องให้ปรับ pH เป็น 1.7 โดยเติมกรดไฮโดรคลอริก 0.3 N หลังจาก 10 นาทีปรับ pH เป็น 4.7 โดยเติมโซเดียมอะซิเตต 0.5 M เทสารละลายลงในขวดวัดปริมาตร 200 มล. เจือจางด้วยน้ำตามปริมาตรแล้วผสม สารละลายนี้จะคงตัวประมาณ 5 วันเมื่อแช่เย็น
สารละลายกรดไตรคลอโรอะซิติกละลายกรดไตรคลอโรอะซิติก 140 กรัมในน้ำประมาณ 750 มล. โอนสารละลายไปยังขวดวัดปริมาตร 1,000 มล. เจือจางด้วยน้ำตามปริมาตรและผสมให้เข้ากัน

การเตรียมตัวอย่างละลายตัวอย่างในสารละลายอะซิเตทบัฟเฟอร์เพื่อสร้างสารละลายที่มีในแต่ละมิลลิลิตรระหว่าง 9 ถึง 22 HUT (ความเข้มข้นดังกล่าวจะทำให้เกิดการอ่านค่าการดูดซับในขั้นตอนด้านล่างภายในช่วงที่ต้องการ 0.2 ถึง 0.5)

ขั้นตอนของกรดโปรตีเอส
Pipet 10.0 มล. ของ Substrate Solution ในแต่ละชุดของหลอดทดลองขนาด 25- × 150 มม.: หนึ่งหลอดสำหรับการทดสอบเอนไซม์แต่ละชนิดและอีกหลอดหนึ่งสำหรับวัสดุพิมพ์ว่าง อุ่นท่อในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 40 °ประมาณ 5 นาที ในแต่ละหลอดยกเว้นวัสดุพิมพ์ว่างให้เพิ่ม 2.0 mL ของการเตรียมตัวอย่างและเริ่มกำหนดเวลาของปฏิกิริยาในขณะที่เติมสารละลาย เติม Acetate Buffer Solution 2.0 มล. ลงในท่อเปล่าของวัสดุพิมพ์ ปิดท่อด้วยจุกยางเบอร์ 4 แล้วแตะแต่ละหลอดเบา ๆ เป็นเวลา 30 วินาทีกับฝ่ามือเพื่อผสม ให้ความร้อนแต่ละหลอดในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 40 °เป็นเวลา 30 นาทีจากนั้นให้ปิเปตสารละลายกรดไตรคลอโรอะซิติก 10.0 มล. ลงในแต่ละหลอดอย่างรวดเร็ว เขย่าหลอดแต่ละหลอดแรง ๆ กับตัวอุดเป็นเวลาประมาณ 40 วินาทีจากนั้นปล่อยให้เย็นลงที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมงเขย่าหลอดแต่ละหลอดกับจุกในช่วงเวลา 10 ถึง 12 นาทีในช่วงเวลานี้ เตรียมช่องว่างของเอนไซม์ดังต่อไปนี้ความร้อนในท่อที่แยกจากกัน 10.0 มล. ของสารละลายพื้นผิวและการเตรียมตัวอย่างประมาณ 5 มล. ในอ่างน้ำเป็นเวลา 30 นาทีจากนั้นเติมสารละลายกรดไตรคลอโรอะซิติก 10.0 มล. ลงในสารละลายพื้นผิวเขย่าให้เข้ากัน เป็นเวลา 40 วินาทีและในส่วนผสมนี้เพิ่มการเตรียมตัวอย่างที่อุ่นไว้ 2.0 มล. เขย่าอีกครั้งและทำให้เย็นลงที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมงโดยเขย่าเป็นระยะเวลา 10 ถึง 12 นาที
เมื่อครบ 1 ชม. เขย่าหลอดแต่ละหลอดแรง ๆ และกรองผ่านกระดาษกรอง Whatman No. 42 หรือเทียบเท่าขนาด 11 ซม. เติมครึ่งแรกของการกรองผ่านกระดาษเดียวกัน กำหนดค่าการดูดซับของแต่ละฟิลเตรตในเซลล์ 1 ซม. ที่ 275 นาโนเมตรด้วยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่เหมาะสมโดยใช้ฟิลเตรตจากวัสดุพิมพ์ว่างเพื่อตั้งค่าเครื่องมือให้เป็นศูนย์ แก้ไขการอ่านแต่ละครั้งโดยลบการอ่านค่าว่างของเอนไซม์ที่เหมาะสมและบันทึกค่าที่ได้รับเป็น AU
[หมายเหตุ: หากไม่ได้รับการอ่านค่าการดูดซับที่แก้ไขระหว่าง 0.2 ถึง 0.5 ให้ทำการทดสอบซ้ำโดยใช้การเตรียมเอนไซม์มากหรือน้อยตามความจำเป็น]

Standard Curve Transfer 100.0 มก. ของ L-tyrosine เกรดโครมาโตกราฟีหรือเทียบเท่า (Aldrich Chemical Co. ) ซึ่งก่อนหน้านี้ทำให้แห้งเป็นน้ำหนักคงที่ไปยังขวดปริมาตร 1,000 มล ละลายในกรดไฮโดรคลอริก 0.1 N 60 มล. เมื่อ L-tyrosene ละลายหมดแล้วให้เจือจางสารละลายให้ได้ปริมาตรกับน้ำและผสมให้เข้ากัน สารละลายนี้มีไทโรซีน 100 ไมโครกรัมใน 1.0 มล. เตรียมการเจือจางอีกสามครั้งจากสารละลายสต็อกนี้ให้มีไทโรซีน 75.0, 50.0 และ 25.0 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ตรวจสอบการดูดซับของสารละลายทั้งสี่ที่ 275 นาโนเมตรในเซลล์ 1 ซม. บนเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่เหมาะสมเทียบกับกรดไฮโดรคลอริก 0.006 N เตรียมพล็อตการดูดซับเทียบกับความเข้มข้นของไทโรซีน กำหนดความชันของเส้นโค้งในแง่ของการดูดซับต่อ µg ของไทโรซีน คูณค่านี้ด้วย 1.10 และบันทึกเป็น AS ควรได้ค่าประมาณ 0.0084

การคำนวณกรดโปรตีเอส
โปรตีน HUT หนึ่งหน่วย (กรดโปรตีเอส) กิจกรรมหมายถึงปริมาณของเอนไซม์ที่ผลิตใน 1 นาทีภายใต้เงื่อนไขที่กำหนดไฮโดรไลเสตที่มีการดูดซับที่ 275 นาโนเมตรเท่ากับสารละลายที่มีไทโรซีน 1.10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรในกรดไฮโดรคลอริก 0.006 N
คำนวณ HUT ต่อกรัมของการเตรียมเอนไซม์เดิมโดยสมการ

HUT / g = (AU / AS) × (22/30 วัตต์)

ซึ่ง 22 คือปริมาตรสุดท้ายของสารละลายทดสอบ 30 คือเวลาเกิดปฏิกิริยาหน่วยเป็นนาที และ W คือน้ำหนักเป็นกรัมของตัวอย่างต้นฉบับที่ถ่าย

[หมายเหตุ: ค่า AS ภายใต้เงื่อนไขที่ควบคุมอย่างรอบคอบและเป็นมาตรฐานคือ 0.0084; ค่านี้อาจใช้สำหรับงานประจำแทนค่าที่ได้จากเส้นโค้งมาตรฐาน แต่ควรใช้ค่าที่แน่นอนที่คำนวณจากเส้นโค้งมาตรฐานเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำยิ่งขึ้นและในกรณีที่มีข้อสงสัย]

ใบรับรองการวิเคราะห์

ชื่อผลิตภัณฑ์	กรดโปรตีเอส
ชื่ออื่น ๆ	ไม่มี	ประเทศต้นกำเนิด	ประเทศจีน
ความเครียด	เชื้อรา Aspergillus oryzae	วันที่ผลิต	13 พฤษภาคม 2562
หมายเลขแบทช์	SP19050903	วันหมดอายุ	12 พฤษภาคม 2564
แพ็คเกจ	25 กก. / ถัง	ปริมาณ	100 กก
มาตรการ	ข้อมูลจำเพาะ	ผล	วิธี
การวิเคราะห์ทางกายภาพและทางเคมี
คำอธิบาย	ผงสีน้ำตาล	สอดคล้อง	ภาพ
กลิ่นและรสชาติ	ลักษณะของกลิ่นและรสชาติ	สอดคล้อง	ลิ้มรส
ความชื้น	NMT 7%	5.1%	เครื่องวิเคราะห์ความชื้น
การระบุ
กิจกรรมที่ระบุตัวตนได้	เป็นบวกสำหรับกิจกรรม Bromelain	สอดคล้อง	ในบ้าน
กิจกรรม
กิจกรรมโปรตีเอส	NLT 500,000 HUT / g	508,270 HUT / ก	FCC VII
จุลชีววิทยา
จำนวนแบคทีเรียทั้งหมด โคลิฟอร์มแบคทีเรีย (CFU / g) แม่พิมพ์และยีสต์ อีโคลี ซัลโมเนลลา เชื้อ Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa	NMT 3,000 CFU / g NMT 30 CFU / ก NMT 100 CFU / g ขาด ขาด ขาด ขาด	500 CFU / ก ＜10 CFU / ก ＜10 CFU / ก ตรวจไม่พบ ตรวจไม่พบ ตรวจไม่พบ ตรวจไม่พบ	อย. BAM Online Ch.3 อย. BAM Online Ch.4 อย. BAM Online Ch. 2 อย. BAM Online Ch.4 อย. BAM Online Ch.5 อย. BAM Online Ch 12 AOAC
โลหะหนัก
ตะกั่ว ปรอท แคดเมียม สารหนู	NMT 3 หน้าต่อนาที NMT 0.1 หน้าต่อนาที NMT 1 หน้าต่อนาที NMT 1 หน้าต่อนาที	0.21 หน้าต่อนาที ＜0.1หน้าต่อนาที ＜1หน้าต่อนาที ＜1ppm	USP <231> USP <231> USP <231> USP <231>
การเก็บรักษา: เก็บในที่แห้งและเย็นและป้องกันไม่ให้ถูกแสงเก็บถังไว้ใกล้ ๆ เมื่อไม่ใช้งาน สรุป: เป็นไปตามมาตรฐาน IU อายุการเก็บรักษา: อายุการเก็บรักษาของกรดโปรตีเอสภายใต้เงื่อนไขการจัดเก็บที่กำหนดและการบรรจุแบบแน่นอากาศจะเป็นเวลา 2 ปี ผลิตภัณฑ์เป็นไปตามข้อกำหนดดังกล่าวข้างต้น ได้รับการอนุมัติโดย RICKY H. ZHU Authorized Signatory

*The above information is a direct translation of the information provided to Newgen Biotech from the manufacturer of กรดโปรตีเอส. This Certificate of Analysis should be used for informational purposes and is not intended as a substitute for strict quality control analysis by the purchaser of this product.

บรรจุภัณฑ์และการจัดเก็บ

ถุงบรรจุอาหารแข็ง 25 กก. / บาร์เรล

กรดโปรตีเอสควรเก็บไว้ในที่แห้งเย็นและมีอากาศถ่ายเทได้สะดวกห่างจากแสงแดดความร้อน

การชำระเงิน:T / T, Paypal, Western Union, Alibaba Trade Assurance, VISA, MasterCard, e-Checking, Pay Later, LC และอื่น ๆ