เบต้ากลูแคน

การประยุกต์ใช้และหลักการ

การประยุกต์ใช้และหลักการ This procedure is used to determine Beta glucan activity of enzyme preparations derived from Aspergillus niger var. and Bacillus subtilis var. The assay is based on a 15-min hydrolysis of lichenin substrate at 40°and at pH 6.5. The increase in reducing power due to liberated reducing groups is measured by the neocuproine method.

รีเอเจนต์และโซลูชั่น
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ละลายโพแทสเซียมฟอสเฟต 13.6 กรัมในน้ำประมาณ 1900 มล. เติมสารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ 70% จน pH เท่ากับ 6.5 ± 0.05 จากนั้นถ่ายสารละลายลงในขวดวัดปริมาตร 2,000 มล. เจือจางให้ได้ปริมาตรกับน้ำแล้วผสม .
Neocuproine Solution A ละลายโซเดียมคาร์บอเนต 40.0 กรัมไกลซีน 16.0 กรัมและเพนทาไฮเดรตแบบคิวพริก 450 มก. ในน้ำประมาณ 600 มล. เทสารละลายลงในขวดวัดปริมาตร 1,000 มล. เจือจางด้วยน้ำตามปริมาตรแล้วผสม
Neocuproine Solution B ละลายนีโอโคโพรอีนไฮโดรคลอไรด์ 600 มก. ในน้ำประมาณ 400 มล. ถ่ายสารละลายลงในขวดวัดปริมาตร 500 มล. เจือจางให้ได้ปริมาตรด้วยน้ำและผสม ทิ้งเมื่อเกิดสีเหลือง
Lichenin Substrate บดไลเคนนิน 150 มก. (Sigma Chemical Co. , Catalog No. L-6133 หรือเทียบเท่า) ให้เป็นผงละเอียดในครกแล้วละลายในน้ำประมาณ 50 มล. ที่อุณหภูมิ 85 ° หลังจากสารละลายเสร็จสมบูรณ์ (20 ถึง 30 นาที) เติมโซเดียมโบโรไฮไดรด์ 90 มก. และให้ความร้อนต่ำกว่าจุดเดือดเป็นเวลา 1 ชม. เติม Amberlite MB-3 15 กรัมหรือเรซินแลกเปลี่ยนไอออนที่เทียบเท่าและคนให้เข้ากัน 30 นาที กรองด้วยเครื่องดูดฝุ่นผ่านกระดาษกรอง Whatman No. 1 หรือเทียบเท่าในช่องทางBüchnerแล้วล้างกระดาษด้วยน้ำประมาณ 20 มล. เติมโพแทสเซียมฟอสเฟตแบบโมโนเบสิก 680 มก. ลงในฟิลเตรตและรีฟิลเตอร์ผ่านแผ่นกรอง 0.22 มิลลิโปร์หรือเทียบเท่า ล้างแผ่นด้วยน้ำ 10 มล. และปรับ pH ของการกรองเป็น 6.5 ± 0.05 ด้วยโซเดียมไฮดรอกไซด์ 1 N หรือกรดไฮโดรคลอริก 1 N ถ่ายสารกรองลงในขวดวัดปริมาตร 100 มล. เจือจางด้วยน้ำตามปริมาตรแล้วผสม เก็บที่อุณหภูมิ 2 ถึง 4 °เป็นเวลาไม่เกิน 3 วัน
สารละลายกลูโคสมาตรฐานละลายเดกซ์โทรสปราศจากน้ำ 36.0 มก. ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ในขวดปริมาตร 1000 มล. เจือจางให้ได้ปริมาตรด้วยน้ำและผสม
การเตรียมการทดสอบเตรียมสารละลายจากตัวอย่างการเตรียมเอนไซม์เพื่อให้การเจือจางขั้นสุดท้าย 1 มล. มีระหว่าง 0.01 ถึง 0.02 หน่วยเบต้ากลูแคน ชั่งน้ำหนักตัวอย่างโอนลงในขวดวัดปริมาตรที่มีขนาดเหมาะสมเจือจางเป็นปริมาตรด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์และผสม

ขั้นตอน
ปิเปต 2 มล. ของไลเคนนินซับสเตรตลงในหลอดทดลองสี่หลอดแยกกันโดยให้อุณหภูมิ 25 มล. และให้ความร้อนหลอดในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 40 °เป็นเวลา 10 ถึง 15 นาทีเพื่อปรับสมดุล
หลังจากการปรับสมดุลเติมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 1 มล. ลงในหลอด 1 (สารตั้งต้นว่าง), สารละลายมาตรฐานกลูโคส 1 มล. ต่อท่อ 2 (มาตรฐานกลูโคส), สารละลายนีโอโคโพรอีน A 4 มล. และชุดเตรียมทดสอบ 1 มล. ลงในหลอด 3 (เอนไซม์เปล่า ) และ 1 mL ของ Test Preparation ต่อหลอด 4 (ตัวอย่าง) เตรียมหลอดที่ห้าสำหรับบัฟเฟอร์ว่างและเติมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 3 มล.
บ่มหลอดทั้งห้าที่อุณหภูมิ 40 °เป็นเวลา 15 นาทีจากนั้นเติม Neocuproine Solution A 4 มล. ลงในหลอด 1, 2, 4 และ 5 เติม Neocuproine Solution B 4 มล. ลงในหลอดทั้งห้าหลอดและปิดฝาแต่ละหลอด หินอ่อนแก้วขนาด.
[ข้อควรระวัง: ห้ามใช้จุกยาง ]
อุ่นหลอดในอ่างน้ำเดือดอย่างแรงเป็นเวลา 12 นาทีเพื่อให้เกิดสีจากนั้นทำให้เย็นลงในน้ำเย็นที่อุณหภูมิห้องและปรับปริมาตรของแต่ละหลอดเป็น 25 มล. ด้วยน้ำ ปิดฝาท่อด้วย Parafilm หรือวัสดุปิดอื่น ๆ ที่เหมาะสมและผสมโดยการพลิกกลับหลาย ๆ ครั้ง
กำหนดค่าการดูดซับของแต่ละสารละลายที่ 450 นาโนเมตรในเซลล์ 1 ซม. ด้วยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่เหมาะสมเทียบกับบัฟเฟอร์ที่ว่างในท่อ 5

การคำนวณ
หนึ่งหน่วยเบต้ากลูแคน (BGU) ถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จะปลดปล่อยน้ำตาลรีดิวซ์ (เทียบเท่ากับกลูโคส) ในอัตรา 1 µmol / นาทีภายใต้เงื่อนไขของการทดสอบ
คำนวณกิจกรรมของการเตรียมเอนไซม์ที่นำมาวิเคราะห์ดังนี้
BGU = [(A4 A3) × 36 × 106] / [(A2 A1) × 180 × 15 × µg ตัวอย่าง]

ซึ่ง A4 คือการดูดซับของตัวอย่าง (หลอด 4), A3 คือการดูดซับของเอนไซม์ว่าง (หลอด 3), A2 คือการดูดซับของน้ำตาลกลูโคสมาตรฐาน (หลอด 2), A1 คือการดูดซับของสารตั้งต้นที่ว่าง (หลอด 1), 36 คือไมโครกรัมของกลูโคสใน Glucose Standard Solution, 106 เป็นปัจจัยที่แปลงไมโครกรัมเป็นกรัม, 180 คือน้ำหนักของกลูโคส 1 µmol และ 15 คือเวลาในการเกิดปฏิกิริยาในหน่วยนาที

ใบรับรองการวิเคราะห์

* ข้อมูลข้างต้นเป็นการแปลโดยตรงของข้อมูลที่ให้กับ Newgen Biotech จากผู้ผลิตผลิตภัณฑ์นี้ ใบรับรองการวิเคราะห์นี้ควรใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในการให้ข้อมูลและไม่ได้มีไว้เพื่อทดแทนการวิเคราะห์การควบคุมคุณภาพอย่างเข้มงวดโดยผู้ซื้อผลิตภัณฑ์นี้

บรรจุภัณฑ์และการจัดเก็บ

ถุงบรรจุอาหารแข็ง 25 กก. / บาร์เรล

เก็บในที่แห้งเย็นและอากาศถ่ายเทได้ดีห่างจากแสงแดดความร้อน

การชำระเงิน:T / T, Paypal, Western Union, Alibaba Trade Assurance, VISA, MasterCard, e-Checking, Pay Later, LC และอื่น ๆ