ผง Dextranase

4.2 Sample determination
4.2.1 enzyme-like preparation
The fermentation broth was centrifuged at 8000 rpm for 10 minutes, the supernatant was taken, and the enzyme solution was appropriately diluted by a certain multiple, so that the final OD540 was in the OD540 range of 0.1-0.6 mg / mL glucose content.

4.2.2 enzyme-like assay
(1) Take 900μL of pH 5.5 buffer to dissolve dextran T-2000 to make a 2.0% solution, add it as a substrate to four suitable test tubes, and place each test tube in a 55℃thermostatic water bath to incubate 5min.
(2) Add 0.1 mL of the appropriately diluted enzyme solution to three of the pre-heated test tubes, and add 0.1 mL of distilled water as the blank for the precise reaction for 10 minutes.
(3) Immediately add 2 mL of DNS to each of the above four test tubes and place in a boiling water bath for precise reaction for 5 min, then quickly cool down, and then make up to 25 mL with distilled water.
(4) The spectrophotometer is used to zero the instrument with water, and the absorbance of each sample tube and blank at 540 nm is measured in a cuvette with an optical path of 1 cm. Record data.
4.2.3 Calculation
Measure the average of the OD values of each measured parallel sample, and calculate the unit of enzyme activity according to the following formula

Dextranase activity (U / mL) = 1000 n (A-b) / (aMt)

Where A is the average value of sample OD540
 b and a are coefficients of the standard curve
 n: dilution ratio of enzyme solution
 t: enzymatic reaction time = 10
 M: Molar mass of glucose = 180.16

CERTIFICATE OF ANALYSIS

1 หลักการ

ผงเดกซ์ทราเนสไฮโดรไลซ์ 1,6-D ± -D-glucan glycoside พันธะและปล่อยกลุ่มน้ำตาลรีดิวซ์เพื่อทำปฏิกิริยากับกรด 3,5-dinitrosalicylic (DNS reagent) เนื้อหาเป็นสัดส่วนโดยตรง ค่าการดูดกลืนแสงวัดได้ที่ 540 นาโนเมตรและสามารถใช้เส้นโค้งมาตรฐาน (คำนวณเป็นกลูโคส) เพื่อให้ได้ปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์และกิจกรรมกลูคาเนสสามารถคำนวณได้ตามนี้

2 เครื่องมือและอุปกรณ์
2.1 เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์: ความแม่นยำ 0.0001g
2.2 อ่างน้ำอุณหภูมิคงที่: ความแม่นยำ± 0.2 â„ ƒ
2.3 โครโนกราฟ
2.4 สเปกโตรโฟโตมิเตอร์
2.5 อ่างน้ำเดือด
2.6 เครื่องผสมแบบสั่น

2.7 pH meter: ความแม่นยำ 0.01pH หน่วย

3 รีเอเจนต์และสารละลาย

3.1 การเตรียม pH 5.5 Disodium Hydrogen Phosphate-Citric Acid Buffer: Solution A: 20.369g disodium hydrogen phosphate dodecahydrate ละลายกับน้ำประมาณ 200mL สารละลาย B: โมโนไฮเดรตกรดซิตริก 4.530 กรัมกับน้ำประมาณ 200 มล. ละลาย ผสมของเหลว A และของเหลว B และสร้างได้ถึง 500mL ฆ่าเชื้อที่ 121 â„ ƒเป็นเวลา 20 นาที

3.2 การเตรียมสารละลายเดกซ์แทรน (T-2000) 2%: ชั่งน้ำหนักเดกซ์แทรน 2 กรัม (T-2000) อย่างถูกต้องลงในบีกเกอร์ 100 มล. เติม pH = 5.5 ไดโซเดียมไฮโดรเจนฟอสเฟต - ซิเตรตบัฟเฟอร์เพื่อละลายรอจนกระทั่งหลังจากการละลายเสร็จสมบูรณ์แล้วให้โอนไปยัง 100ml ขวดปริมาตรและทำบัฟเฟอร์ได้ถึง 100 มล.

3.3 การเตรียมโซลูชัน DNS:
(1) ชั่งกรด 3,5-dinitrosalicylic 3.15 กรัมละลายกับน้ำประมาณ 500 มล. สามารถละลายได้ด้วยความร้อน แต่อุณหภูมิต้องไม่เกิน 45 â„„
(2) โซเดียมไฮดรอกไซด์หนัก 20 กรัมละลายในน้ำประมาณ 200 มล.
เพิ่ม (2) ถึง (1) จากนั้นเติมโพแทสเซียมโซเดียมทาร์เทรตเตตระไฮเดรต 91 กรัมฟีนอล 2.5 กรัมและโซเดียมซัลไฟต์ 2.5 กรัม หลังจากละลายหมดแล้วให้ทำปริมาณมากถึง 1,000 มล. ใส่ในขวดสีน้ำตาลและวางไว้ในที่เย็นและมืดหลังจาก 10 วันกรองด้วยกระดาษกรองเพื่อใช้ .
3.4 การเตรียมสารละลายน้ำตาลกลูโคสมาตรฐาน

สารละลายกลูโคส (1 มก. / มล.): ชั่งกลูโคสอย่างถูกต้อง 0.100 กรัมและละลายเป็นปริมาตรสุดท้าย 100 มล. ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ pH = 5.5

4 ขั้นตอนการวิเคราะห์

4.1 การวาดเส้นโค้งมาตรฐาน
(1) นำกลูโคสประมาณ 1 กรัมอบที่ 60 â„ ƒ 30 นาทีแล้วเพิ่มอุณหภูมิเป็น 80 â„ ƒอบ 30 นาทีจากนั้นเพิ่มอุณหภูมิเป็น104â„ ƒอบ 1 ชั่วโมง และเย็นลงเพื่อใช้ในภายหลัง
(2) การเตรียมสารละลายมาตรฐานกลูโคสปราศจากน้ำ: กลูโคส 0.1000 กรัมจะถูกชั่งน้ำหนักอย่างถูกต้องละลายและประกอบได้มากถึง 100 มล.
(3) ใช้หลอดวัดสี 6 หลอดที่สำเร็จการศึกษา 25 มล. และทดสอบตามตารางต่อไปนี้:

บรรจุภัณฑ์และการจัดเก็บ

ถุงบรรจุอาหารแข็ง 25 กก. / บาร์เรล

ควรเก็บผงเดกซ์ทราเนสไว้ในที่แห้งเย็นและมีอากาศถ่ายเทได้สะดวกห่างจากแสงแดดความร้อน

การชำระเงิน:T / T, Paypal, Western Union, Alibaba Trade Assurance, VISA, MasterCard, e-Checking, Pay Later, LC และอื่น ๆ